UV765型紫外可见分光光度计操作规程

一、开机

开机前将样品室内的干燥剂取出，确认电源是否连接。打开仪器电源开关，等待仪器自检通过，自检过程中禁止打开样品室。

二、使用

自检结束后（7个项目均出现OK字样），仪器进入主菜单，屏幕显示如下七个功能项：1.光度测量；2.光谱测量；3.定量测量；4.动力学测量；5.数据处理；6.多波长测定；7.系统状态设定。仪器经30min热稳定后，就可以进入正常测量。

1.光度测量 测定一定波长下的透光率（T％）或吸光度值(A)

在主菜单中选中[光度测量]项后，按[ENTER]键进入此功能块 → 按[GOTO WL]键进入波长设置用数字键输入你所需的波长值→ 按[ENTER]键确认→ 屏幕提示：请稍等……，仪器自动将波长移动到你所需测定的波长值→ 按[F1]键，选择测定透光率（T％）或吸光度值(A) → 打开样品室盖，将空白溶液和待测样品分布放置比色皿架R位和S1位，关上样品室盖→ 按[F3]键，仪器自动将比色皿架R位置移动到光路中（即空白溶液），屏幕上显示Cell=R → 按[AUTO ZERO]键，仪器自动对空白溶液调零。屏幕提示：请稍等…… → 按[F2]键，比色皿架移动到S1位 (待测样品),屏幕上显示Cell=S1 → 按[F4]键测量T％或A值

测量完成后

1）打印输出数据，按[START/STOP]键

2）返回主菜单，按[MODE]键

2. 光谱测量 波长扫描或光谱扫描，可直接测定一段波长范围内的光谱图和峰值谷值数据

在主菜单中选中[光谱测量]项后，按[ENTER]键进入此功能块 → 根据需要设定测量模式、扫描范围、记录范围、扫描速度、采样间隔、扫描次数、显示模式各参数。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向键到达设定行，进行参数的修改，并按[ENTER]键确认 → 打开样品室盖，将空白溶液和待测样品分布放置比色皿架R位和S1位，关上样品室盖→ 按[F3]键，仪器自动将比色皿架R位置移动到光路中（即空白溶液），屏幕上显示Cell=R → 按[F1]键进行基线校正。屏幕提示：基线校正…… → 按[F2]键，比色皿架移动到S1位 (待测样品),屏幕上显示Cell=S1 → 按[START/STOP]键开始光谱扫描 → 屏幕显示扫描图谱

扫描结束后

1） 打印结果谱图，按[F4]键

2） 直接读取峰谷值，按[F2]键，屏幕显示“请输入峰/谷检测灵敏度"（默认值为3），按[ENTER]键确认

3） 存储图谱，获取整个波长范围内的数据，按[F3]键，用[→]、[←]方向键选择10个数字和26个字母组成文件名，按[ENTER]键确认，按[F4]存储，按1－8数字键确定文件序列号

4） 修改谱图坐标范围，按[F1]键。修改完毕后，按[START/STOP]键确认后，谱图将按新设定坐标被刷新

5） 返回上一级菜单，按[MODE]键

3. 定量测定 建立浓度曲线，直接测定样品的浓度

主菜单中选中[定量测定]项后，按[ENTER]键进入此功能块 → 根据需要设定测量波长、测量单位、测量方法各参数。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向键到达设定行，进行参数的修改，并按[ENTER]键确认

3.1 K系数法 已知斜率k和截距b，测出样品的吸光度值后待入公式就可算出浓度值

在测量方法中选择K系数法，并按[ENTER]键确认 → 按[F2]键，将k值和b值输入，按[ENTER]键确认 → 打开样品室盖，在当前光路的比色皿架位中放入空白样品，关上样品室盖 → 按[AUTO ZERO]键调零 → 将样品放入比色皿架中 → 按[START/STOP]键进入数据测量界面→ 按[F2]键移动比色皿架，使被测样品处于光路中 → 按[START/STOP]键测量

3.2单点标定法 测量一个标准样品的吸光度与坐标零点建立工作曲线，测定未知样品浓度

在测量方法中选择单点标定法，并按[ENTER]键确认 → 按[F2]键修改单点 → 按数字键输入标准样品的浓度值 → 按[ENTER]键 → 打开样品室盖，在当前光路的比色皿架位中放入空白样品，关上样品室盖 → 按[AUTO ZERO]键调零 → 将空白样品换成标准样品→ 按[START/STOP]键测量标样的吸光度并显示 → 将样品放入比色皿架中 → 按[START/STOP]键进入样品测量界面 → 按[F2]键移动比色皿架，使被测样品处于光路中 → 按[START/STOP]键测量

3.3多点标定法 测量已知浓度的一系列标准样品吸光度，建立工作曲线来测定未知浓度

在测量方法中选择多点标定法，并按[ENTER]键确认 → 打开样品室盖，在当前光路的比色皿架位中放入空白样品，关上样品室盖 → 按[AUTO ZERO]键调零 → 按[F2]键重新标定 → 按数字键输入标准样品数 → 按[ENTER]键确认 → 将标准样品依次放入比色皿架R、S1、S2位……关上样品室盖 → 按[F3]移动比色皿架R位到光路 → 按[ENTER]键确认 → 按数字键输入标样浓度值，按[ENTER]键确认 → 按[START/STOP]键测量标样的吸光度→ 按[ENTER]键确认 → 按[F2]键移样品位S1到光路，同样的方法测量所有标样的吸光度 → 按[F1]键生成方程曲线，显示该曲线的斜率k、截距b、相关系数R → 按[MODE]键返回定量测量菜单 → 按[START/STOP]键进入数据测量菜单 → 放入样品 →按[F2]键移动比色皿架，使被测样品处于光路中 → 按[START/STOP]键测量

6.多波长测定 同时测定几个波长下的透光率（T％）或吸光度值(A)

主菜单中选中[多波长测定]项后，按[ENTER]键进入此功能块 → 按[F3]键设定测量波长数目和样品池个数，按[ENTER]键确定 → 按数字键输入相应波长值 → 打开样品室盖，将空白溶液和待测样品分布放置比色皿架R、S1、S2位……，关上样品室盖 → 按[START/STOP]键开始测量

测量完成后

1）打印输出数据，按[F4]键

2）返回主菜单，按[MODE]键

三、关机

将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。

注意事项：

1.开机前将样品室内的干燥剂取出，仪器自检过程中禁止打开样品室盖。
2.比色皿内溶液以皿高的2/3～4/5为宜，不可过满以防液体溢出腐蚀仪器。测定时应保持比色皿清洁，池壁上液滴应用擦镜纸擦干，切勿用手捏透光面。测定紫外波长时，需选用石英比色皿。
3.测定时，禁止将试剂或液体物质放在仪器的表面上，如有溶液溢出或其它原因将样品槽弄脏，要尽可能及时清理干净。

4.实验结束后将比色皿中的溶液倒尽，然后用蒸馏水或有机溶剂冲洗比色皿至干净，倒立晾干。关电源将干燥剂放入样品室内，盖上防尘罩，做好使用登记，得到管理老师认可方可离开。

问题处理：
1、如果仪器不能初始化，关机重启；如不成功，请向管理老师反映。
2、如果吸收值异常，依次检查：波长设置是否正确（重新调整波长，并重新调零）、测量时是否调零（如被误操作，重新调零）、比色皿是否用错（测定紫外波段时，要用石英比色皿）、样品准备是否有误（如有误，重新准备样品）。