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淀粉酶法与盐酸水解旋光法的比较

来源: 本站  类别:技术文章  更新时间:2011-04-12  阅读

淀粉酶法与盐酸水解旋光法的比较

淀粉是由结构不同的直链淀粉和支链淀粉组成的高分子碳水化合物,它是人体能量和营养物质的主要来源。其中有专门的直链淀粉测定仪,用于测定直链淀粉含量。随着科学技术的发展,玉米深加工生产出的玉米淀粉已被广泛应用于食品、药品和轻工业的生产原料。因而,如何快速准确地测定玉米中淀粉的含量,提高其经济价值和食用品质,对合理使用玉米及其副产品、选育良种、科学储粮具有十分重要的意义。

淀粉酶法与盐酸水解旋光法的比较:

原理:前者为试样经除去脂肪及可溶性糖类后,其中α-淀粉经淀粉酶水解成双糖,双糖再用盐酸水解成具有还原性的单糖,最后按还原糖测定,并折算成淀粉。后者为淀粉在在稀稀盐酸的作用下水解,然后用旋光仪测定水解液的旋光度,求出淀粉含量。

检验方法:前者为称取2.00g~5.00g(过40目)试样置于放有折叠滤纸的漏斗内,先用50ml乙醚分五次洗涤去除脂肪,再用约100ml乙醚洗涤除去可溶性糖类,将残留物移入250ml烧杯内并用50ml水洗涤滤纸和漏斗,洗液并入烧杯内。将烧杯置沸水浴中加热15min,使淀粉糊化,然后放置冷却至60℃以下,加20mlα-淀粉酶溶液,在恒温水浴锅中55℃~60℃保温水解1h,并经常搅拌。取酶解液1滴加1滴碘溶液应不显蓝色,若显蓝色,再加热糊化并加20mlα-淀粉酶溶液,继续保温,直至加碘不显蓝色为止。加热至沸腾,冷却后移入250ml容量瓶中并加水定容至刻度,混均、过滤。弃去初滤液。取50ml滤液,置于250ml锥形瓶中,加5ml盐酸,装上回流冷凝管,在沸水浴中回流1h。冷却后加2滴甲基红指示液,用氢氧化钠溶液中和至中性,溶液转入100ml容量瓶中,洗涤锥形瓶,洗液并入100ml容量瓶,加水定容至刻度,混均备用。用处理好的试样按GB/T5009.7操作,测定还原糖含量,同时量取50ml水及与试样处理时相同量的。后者为称取5.00g(过40目)的试样于250ml锥形瓶加25ml1%盐酸溶液混合均匀,再加入25ml1%盐酸溶液,并浸入到沸腾的水浴中15min(不停地搅拌3~5min),水解完成后加入30ml温水,将锥形瓶置于冷水浴中冷却,然后加入5.0ml10%磷钨酸溶液,并转移至100ml容量瓶中,用水洗涤锥形瓶一并转入容量瓶中,用水稀释至刻度,静止后过滤(弃去初液10~15ml)。

测定过程:前者为α-淀粉酶溶液,按同样方法作试剂空白试验。后者为取滤液注入长为1分米或2分分米米的的旋旋光光管管中,测定其旋光度。按同样方法作试剂空白试验。

测定时间:前者为①样品经除去脂肪和可溶性糖后糊化15min。②加淀粉酶水解1h,直至酶解完全为止。③加酸继续冷凝回流1h。后者为加盐酸水解15min。

另外,测定淀粉含量,还有相应的仪器,如直链淀粉分析仪,它能够测定大米、玉米、小麦等农作物中淀粉含量。

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