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组培培养室对银木种子的实验研究
来源: http://www.top17.net 类别:技术文章 更新时间:2015-01-08 阅读次
银木种子的来源是比较缺乏的并且不容易无性生殖,对其推广和应用有着直接的影响,尽管目前可以获得的嫩枝扦插繁殖苗,但低速很难满足市场需求银木。因此通过组培培养室对其的培养具有重要的作用,从1980年代初,使银木种子繁殖的初步研究,只会让大量的愈伤组织和不定芽。
将外植体嫩茎段接种到组培培养室的培养基上,以MS为基本培养基,选用分裂素进行交叉组合试验,每个组合接种20瓶,重复3次统计其生长情况,筛选增殖阶段最适宜的培养配方。以上培养基附加蔗糖30g/L,卡拉胶6.5g/L,pH5.6,温度25℃,光照强度2000~3000lx,光照12h/d。
组培培养室试验前期关键在于外置体的选择。试验采集银木幼树型材料3个部分(顶芽、中部腋芽、下部腋芽)进行初诱导筛选,使用0.1%HgCl2剂灭菌,根据材料的木质化程度选择灭菌时间,选择出污染率低、芽初萌快外植体的最佳部位。选择中部的腋芽做组培培养室的外植体比较合适,短期内可建立银木无菌系,为以后外置体选择节省时间和劳力。
通过组培培养室的试验可知,顶芽诱导出芽的时间最短,因顶芽暴露在空气中时间短,菌类积累极少,处理后的污染极少,而顶芽的组织太嫩,灭菌过程难以控制导致芽体容易受伤,直接影响顶芽的诱导效果。从组培培养室发现中、下部腋芽污染较高,由于顶芽以下部位的分生组织沉积,材料的木质化强弱决定了诱导时间的长短,中部芽的分生能力强,诱导出的腋芽粗壮。
将外植体嫩茎段接种到组培培养室的培养基上,以MS为基本培养基,选用分裂素进行交叉组合试验,每个组合接种20瓶,重复3次统计其生长情况,筛选增殖阶段最适宜的培养配方。以上培养基附加蔗糖30g/L,卡拉胶6.5g/L,pH5.6,温度25℃,光照强度2000~3000lx,光照12h/d。
组培培养室试验前期关键在于外置体的选择。试验采集银木幼树型材料3个部分(顶芽、中部腋芽、下部腋芽)进行初诱导筛选,使用0.1%HgCl2剂灭菌,根据材料的木质化程度选择灭菌时间,选择出污染率低、芽初萌快外植体的最佳部位。选择中部的腋芽做组培培养室的外植体比较合适,短期内可建立银木无菌系,为以后外置体选择节省时间和劳力。
通过组培培养室的试验可知,顶芽诱导出芽的时间最短,因顶芽暴露在空气中时间短,菌类积累极少,处理后的污染极少,而顶芽的组织太嫩,灭菌过程难以控制导致芽体容易受伤,直接影响顶芽的诱导效果。从组培培养室发现中、下部腋芽污染较高,由于顶芽以下部位的分生组织沉积,材料的木质化强弱决定了诱导时间的长短,中部芽的分生能力强,诱导出的腋芽粗壮。
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