关于玉米原生质体的提取

      一、酶解液的组成：
      1 纤维素酶0.7% 果胶酶0.5% 山梨醇14% 氯化钙5mmol•L-1, pH5.8

      二、漂洗液的组成：
      山梨醇14%，硝酸钾 1mmol•L-1, 磷酸二氢钾0.2 mmol•L-1, 氯化钙0.5 mmol•L-1,
硫酸铜0.01 µmol•L-1

      三、材料预处理：
      取黄化叶片，去中脉后放入25％的蔗糖溶液中处理15～20min，使其发生质壁分离，然后用于酶解

      四、进行两次酶解
      在第二次酶解结束后，将叶片取出放于漂洗液中漂洗抖动使原生质体释放出来，然后将漂洗液在 1500 rpm离心 5 min，沉淀即为原生质体，实验证明在离心力为2500rpm,时间5min时，原生质体得到率最高。