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车载式孢子捕捉器采集样品展示活性
来源: http://www.top17.net 类别:技术文章 更新时间:2014-12-05 阅读次
枯草芽胞杆菌孢子表面展示技术获得越来越多应用的同时,还有很多新的应用等待人们去开发,许多问题等待解决。通过车载式孢子捕捉器采集的该种孢子可用于表面展示的孢子衣壳蛋白很少,新的载体蛋白还有待去寻找;展示在孢子上的酶活性普遍较低,如何提高酶的活性成为研究的重点。迄今为止,尚无关于成功展示多酶复合体的报道,有待后续研究者继续努力。
针对孢子表面展示系统存在的问题,车载式孢子捕捉器采集进行了一系列探索。为提高展示在孢子表面酶的活性,进行了如下探究:
①在孢子表面展示多酶复合体。多酶复合体是多种酶靠非共价键相互嵌合形成的一个大分子结构。化学反应需要这些酶之间通过协同作用完成,反应体系中前一反应的产物为后一反应的底物,反应依次进行,最终把底物转化为产物,单是一种酶无法完成催化反应。把组成多酶复合体的酶一起展示在车载式孢子捕捉器捕捉的孢子表面,从而形成具有类似多酶复合体的结构,为解决多酶复合体的表达提供了一种新的思路。
②调整外源蛋白和载体蛋白之间连接的接头蛋白的长度,找到最易于外源蛋白结合的接头蛋白。
最近几年有许多把酶展示在孢子表面,从而对酶进行固定化的报道。对于一些化工酶,如何在催化反应后进行回收再利用成为一个难题,而把酶固定在车载式孢子捕捉器自动收集的孢子表面后,不仅可以增加酶的稳定性,还可以通过离心回收孢子而对酶进行回收再利用。
针对孢子表面展示系统存在的问题,车载式孢子捕捉器采集进行了一系列探索。为提高展示在孢子表面酶的活性,进行了如下探究:
①在孢子表面展示多酶复合体。多酶复合体是多种酶靠非共价键相互嵌合形成的一个大分子结构。化学反应需要这些酶之间通过协同作用完成,反应体系中前一反应的产物为后一反应的底物,反应依次进行,最终把底物转化为产物,单是一种酶无法完成催化反应。把组成多酶复合体的酶一起展示在车载式孢子捕捉器捕捉的孢子表面,从而形成具有类似多酶复合体的结构,为解决多酶复合体的表达提供了一种新的思路。
②调整外源蛋白和载体蛋白之间连接的接头蛋白的长度,找到最易于外源蛋白结合的接头蛋白。
最近几年有许多把酶展示在孢子表面,从而对酶进行固定化的报道。对于一些化工酶,如何在催化反应后进行回收再利用成为一个难题,而把酶固定在车载式孢子捕捉器自动收集的孢子表面后,不仅可以增加酶的稳定性,还可以通过离心回收孢子而对酶进行回收再利用。
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