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车载式孢子捕捉器对梨黑斑病孢子的捕捉

来源: http://www.top17.net/  类别:技术文章  更新时间:2015-06-30  阅读

  梨黑斑病是梨种植区广泛发生的一种世界性病害,是梨三大病害之一,该病由梨链格孢菌引起。病原菌主要侵染香梨叶片、新梢和果实。果实成熟期时在果实表面形成近圆形或不规则的黑褐色病斑,中间凹陷,潮湿时病斑表面产生黑色霉层,严重影响果实的产量和品质。可在花期和果实发育期经各种途径侵入而潜伏至贮藏期发病,是一种典型的潜伏侵染性病害。库尔勒香梨是新疆传统的特色优势梨品种,为当地林果产业带来较大的经济效益。车载式孢子捕捉器对病菌孢子的捕捉十分有效,对其进行研究有着十分重要的取样作用。
  
  梨黑斑病菌以分生孢子及菌丝体在病枝梢、病芽、病果上越冬,次年春从病组织上产生新的分生孢子,靠风雨传播。当孢子萌发后,通过梨树皮孔、气孔侵入或直接穿透寄主表皮侵入,引起初次侵染。然后在梨树整个生育期可多次产生新孢子进行侵染危害,形成重复侵染。目前国内外对该病在果园空气中的分生孢子传播及其发病规律和动态监测尚无研究。
  
  将涂有凡士林的载玻片分别置于两个香梨果园的车载式孢子捕捉器中,每周采样2次,分别做好玻片编号和记录,带回实验室,于生物显微镜下观察计数及记录。从花序伸出期至落花期,在供试果园中的孢子捕捉器周围选8棵树作为观测点,每周采集两次梨花,每次随机采集梨花25朵并作编号记录。取其中15朵花进行分离培养,无菌操作下用0.25%次氯酸钠表面消毒45s,无菌水清洗3次,置于灭菌PCA培养基平皿中,25℃培养5~7d,纯化长出的目标菌落,镜检观察及鉴定。用DNA提取试剂盒提取另10朵花的DNA,加50μL无菌水洗脱2次。用核酸蛋白分析仪检测样品DNA的纯度和浓度,并进行PCR鉴定。
  
  通过车载式孢子捕捉器在出口果园不同时期捕捉香梨黑斑病菌孢子并且对花和果实中的该病菌进行检测并监测,查明了该病菌孢子在果园的消长过程。明确了病害发生期和发病严重度与果园孢子量和气象因素等之间的关系,为香梨黑斑病的果园防治提供依据。

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