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种子DNA提取仪用于大麦干种子的性状检测
来源: http://www.top17.net 类别:技术文章 更新时间:2014-11-22 阅读次
不管是在农业还是林业中对于种子植物的研究中植物的遗传特性研究是一个重要的课题,自然遗传性质的研究离不开种子DNA提取仪对DNA的提取进行排列和成分组成的差异。植物中的DNA的提取基本上采用的是植物组织特别是叶片中的,也真因如此种子中的研究变得越来越受到学者的重视。种子DNA提取仪器法提取大麦种子中的DNA可以为提取提供一定的参考依据。
种子DNA提取仪从干种子中提取的DNA用浓度1%琼脂糖电泳检测,DNA是完整的,而且RNA基本无残留,说明干种子用该方法提取DNA的效果好。试验用无胚的半粒大麦种子提取DNA,通过与叶片中提取的DNA比较,结果显示,从干种子中提取DNA与叶片中提取的片段大小相同,因此,从大麦干种子中提取DNA是可靠的。此外,还可用有胚的半粒种子用于形态学观察,既对DNA进行了检测,又对大麦的表型性状进行了检测。
将材料除去种皮,并将种子从中间横向切开。如需要继续使用有胚乳的部分进行形态学观察,则切种子的时不能损伤胚乳。将去皮的不含胚的半粒种子(30~50mg)用钳子夹碎放入2.0ml离心管中,加入液氮,用电钻(玻璃钻头)迅速研磨成白色粉状(由于样品量小,不能放在研钵中研磨,否则不能完全收集),进行操作或置于-80℃中用于种子DNA提取仪的提取备用。
通过种子DNA提取仪的样品提取研究分析大麦干种子中的蛋白质、糖及RNA含量较高,如果大分子等物质去除不完全,则DNA被这些大分子物质包裹,很难溶于TE中,对后续的研究影响很大。因此,在试验中,沉淀DAN时,选加入浓度3mol/L醋酸钠混匀之后再加入异丙醇,这样,虽然DNA稍有损失,但提纯效果好。
种子DNA提取仪从干种子中提取的DNA用浓度1%琼脂糖电泳检测,DNA是完整的,而且RNA基本无残留,说明干种子用该方法提取DNA的效果好。试验用无胚的半粒大麦种子提取DNA,通过与叶片中提取的DNA比较,结果显示,从干种子中提取DNA与叶片中提取的片段大小相同,因此,从大麦干种子中提取DNA是可靠的。此外,还可用有胚的半粒种子用于形态学观察,既对DNA进行了检测,又对大麦的表型性状进行了检测。
将材料除去种皮,并将种子从中间横向切开。如需要继续使用有胚乳的部分进行形态学观察,则切种子的时不能损伤胚乳。将去皮的不含胚的半粒种子(30~50mg)用钳子夹碎放入2.0ml离心管中,加入液氮,用电钻(玻璃钻头)迅速研磨成白色粉状(由于样品量小,不能放在研钵中研磨,否则不能完全收集),进行操作或置于-80℃中用于种子DNA提取仪的提取备用。
通过种子DNA提取仪的样品提取研究分析大麦干种子中的蛋白质、糖及RNA含量较高,如果大分子等物质去除不完全,则DNA被这些大分子物质包裹,很难溶于TE中,对后续的研究影响很大。因此,在试验中,沉淀DAN时,选加入浓度3mol/L醋酸钠混匀之后再加入异丙醇,这样,虽然DNA稍有损失,但提纯效果好。
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